Link tải luận văn miễn phí cho ae Kết Nối
Nghiên cứu nhân giống in vitro cây Đảng Sâm (Codonopsis javanica ( Blume) Hook.f. Thomson (Khóa luận tốt nghiệp)
Sinh thái và bảo tồn đa dạng sinh học,Bảo tồn đa dạng sinh học,Đa dạng sinh học,Nghiên cứu,Nhân giống in vitro cây Đảng Sâm,Cây Đẳng sâm,Đẳng sâm
DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT.....................................................................v
MỤC LỤC .....................................................................................................................vi
PHẦN 1. MỞ ĐẦU.......................................................................................................1
1.1. Đặt vấn đề................................................................................................... 1
1.2. Mục đích nghiên cứu.................................................................................. 2
1.3. Mục tiêu nghiên cứu................................................................................... 2
1.4. Ý nghĩa của đề tài....................................................................................... 2
1.4.1.Ý nghĩa trong học tập và nghiên cứu khoa học ....................................... 2
1.4.2.Ý nghĩa thực tiễn...................................................................................... 3
PHẦN 2. TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU.................................................................4
2.1. Tổng quan về cây Đảng sâm ...................................................................... 4
2.1.1. Đặc điểm hình thái .................................................................................. 4
2.1.2. Giá trị của Đảng sâm............................................................................... 6
2.2. Khái quát về nuôi cấy mô tế bào thực vật.................................................. 7
2.2.1. Khái niệm ................................................................................................ 7
2.2.2. Cơ sở khoa học của nuôi cấy mô tế bào thực vật.................................... 7
2.2.3. Các giai đoạn của nhân giống vô tính in vitro ........................................ 9
2.3. Một số chất điều hòa sinh trưởng nuôi cấy mô tế bào thực vật ............... 10
2.3.1. Auxin..................................................................................................... 10
2.3.2. Cytokinin............................................................................................... 11
2.4. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây Đảng sâm . .................................. 12
PHẦN 3. ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU....13
3.1. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu............................................................ 13
3.2. Địa điểm, thời gian nghiên cứu................................................................ 13
3.3. Hóa chất và thiết bị .................................................................................. 13
3.4. Nội dung và phương pháp nghiên cứu..................................................... 13
3.4.1. Nội dung nghiên cứu............................................................................. 13
3.4.2. Phương pháp nghiên cứu....................................................................... 14
PHẦN 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN....................................21
4.1. Ảnh hưởng của thời gian khử trùng bằng NaClO 0,5%, HgCl2 0,1% đến
hiệu quả vô trùng vật liệu nuôi cấy chồi Đảng sâm................................... 21
4.2. Ảnh hưởng của môi trường MS, B5, WPhần mềm đến khả năng tái sinh chồi
Đảng sâm.................................................................................................... 23
4.3. Ảnh hưởng của các chất kích thích sinh trưởng đến khả năng nhân nhanh
chồi Đảng sâm............................................................................................ 26
4.3.1. Ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng nhân nhanh chồi Đảng sâm.. 26
4.3.2. Ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với Kinetin đến khả năng nhân
nhanh chồi
4.4.1. Ănh hưởng của nồng độ NAA đến khả năng ra rễ của Đảng sâm............... 31
4.4.2. Ảnh hưởng của nồng độ NAA kết hợp với IAA đến khả năng ra rễ của
Đảng sâm.................................................................................................... 33
PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ................................................................36
5.1. Kết luận .................................................................................................... 36
5.2. Kiến nghị.................................................................................................. 36
TÀI LIỆU THAM KHẢO........................................................................................37
PHỤ LỤC
PHẦN 1
MỞ ĐẦU
1.1. Đặt vấn đề
Sâm dây hay còn gọi là Đảng sâm (Codonopsis javanica ( Blume)
Hook.f.& Thomson.) là loại cây dược liệu có giá trị kinh tế. Đây là cây thuốc
quý, có tác dụng bổ ngũ tạng, nâng cao thể lực, tăng sức dẻo dai, tăng cường
khả năng miễn dịch cho cơ thể, có tác dụng ích huyết, sinh tân dịch, chống
mệt mỏi, giảm stress. Bộ phận dùng làm thuốc duy nhất của Đảng sâm là rễ.
Rễ cây Đảng sâm chứa saponins, triterpenes và steroid. Các hoạt chất có trong
Đảng sâm giúp cho các hoạt động trao đổi chất của cơ thể tốt hơn.
Ở Việt Nam Đảng sâm mọc rải rác ở các tỉnh miền núi phía Bắc. Trước đây
có nhiều ở một số tỉnh Lai Châu, Lào Cai, Hà Giang, Sơn La, Yên Bái, Tuyên
Quang, Cao Bằng, Lạng Sơn. Các tỉnh phía Nam chỉ thấy tập trung ở cao nguyên
Langbian (tỉnh Lâm Đồng) và xung quanh chân núi Ngọc Linh (Đắc Glây, Tu Mơ
Rông, tỉnh Kon Tum và Quảng Nam - Đà Nẵng). Tại Kon Tum, Sâm dây phân bố
chủ yếu ở vùng Ngọc Linh thuộc huyện Tu Mơ Rông và Đăkglei [3].
Đảng sâm đã được ghi trong Sách Đỏ Việt Nam (1996) với cấp đánh
giá "sẽ nguy cấp" (Bậc V) và Danh mục Thực vật rừng, Động vật rừng nguy
cấp, quý hiếm (nhóm 2) của Nghị định số 32/2006/NĐ - CP ngày 30/3/2006
của Chính phủ để hạn chế khai thác, sử dụng vì mục đích thương mại.
Do là loại cây dược liệu có giá trị kinh tế nên hiện nay người dân đang
khai thác theo cách tận thu, dẫn đến ngày càng khan hiếm trong tự nhiên.
Trong tương lai không xa, nguồn cây dược liệu mang tính đặt trưng của vùng
sẽ có nguy cơ cạn kiệt. Vì vậy, chủ động tạo nguồn giống phục vụ cho sản
xuất là vấn đề cấp thiết.
Theo phương pháp nhân giống cổ truyền, Đảng sâm được nhân giống
bằng cách gieo hạt, nhưng phương pháp này có nhiều nhược điểm, như việc
nhân giống mang tính thời vụ, khó tạo ra số lượng lớn theo yêu cầu của sản
xuất.. Ngày nay cùng với sự phát triển của khoa học kỹ thuật việc ứng dụng
nuôi cấy mô tế bào thực vật trong nhân giống đã trở nên phổ biến. Nuôi cấy
mô tế bào tạo ra những cây trồng sạch bệnh, chất lượng tốt, độ đồng đều cao,
hệ số nhân lớn và giữ được đặc tính di truyền của cây mẹ Nhận thức được vấn
đề bảo tồn và phát triển loài dược liệu quý tui tiến hành đề tài : “Nghiên cứu
nhân giống in- vitro cây Đảng sâm (Codonopsis javanica ( Blume)
Hook.f.& Thomson.)”
1.2. Mục đích nghiên cứu
Nhân nhanh được cây Đảng Sâm (Codonopsis javanica ( Blume)
Hook.f.& Thomson) bằng phương pháp in vitro.
1.3. Mục tiêu nghiên cứu
- Xác định được thời gian khử trùng bằng hóa chất khử trùng mang lại
hiệu quả cao nhất trong vô trùng vật liệu nuôi cấy chồi cây Đảng sâm.
- Xác định được môi trường nuôi cấy cơ bản đạt hiệu quả tái sinh chồi
cây Đảng sâm cao nhất.
- Xác định được nồng độ chất kích thích sinh trưởng đạt tỉ lệ nhân
nhanh chồi Đảng sâm cao nhất.
- Xác định được nồng độ chất kích sinh trưởng đạt tỉ lệ ra rễ của Đảng
sâm cao nhất.
1.4. Ý nghĩa của đề tài
1.4.1.Ý nghĩa trong học tập và nghiên cứu khoa học
- Kết quả nghiên cứu của đề tài đưa ra các bước nhân nhanh chồi Đảng
sâm bằng phương pháp in vitro phục vụ cho các nghiên cứu tiếp theo.
- Biết được phương pháp nghiên cứu một vấn đề khoa học, xử lý, phân
tích số liệu, trình bày một bài báo cáo khoa học.
1.4.2.Ý nghĩa thực tiễn
- Đề xuất được quy trình nhân giống Đảng sâm bằng phương pháp nuôi
cấy in vitro, để đảm bảo cung cấp số lượng lớn cây giống có chất lượng cao,
đồng đều cho sản xuất.
- Bảo tồn được loại dược liệu quý đang có nguy cơ tuyệt chủng.
Kết quả trên được giải thích như sau: Cả 3 loại môi trường MS, B5,
WPhần mềm đều chứa hàm lượng: khoáng đa lượng, vi lượng, vitamin, chất kích
thích sinh trưởng… Trong đó môi trường MS là môi trường giàu dinh dưỡng
môi trường B5 là môi trường trung bình và môi trường WPhần mềm là môi trường
cùng kiệt dinh dưỡng. Mặt khác Đảng sâm là loài sống trên thảm mục giàu hàm
lượng khoáng, chất hữu cơ… chúng sẽ phát triển rất tốt khi gặp môi trường
cung cấp đầy đủ các yếu tố trên.
Như vậy với 3 môi trường MS, B5, WPhần mềm thì môi trường MS thích hợp
nhất cho tái sinh chồi Đảng sâm, được sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo.
4.3. Ảnh hưởng của các chất kích thích sinh trưởng đến khả năng nhân
nhanh chồi Đảng sâm
4.3.1. Ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng nhân nhanh chồi Đảng sâm
BA là chất có khả năng phân chia tế bào mạnh mẽ và kích thích phát
sinh chồi bất định do vậy tui chọn chất này để thử nghiệm khả năng tái sinh
chồi của cây đảng sâm .Thí nghiệm được quan sát trong 20 ngày. Kết quả
nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng nhân nhanh chồi của
Đảng sâm được trình bày ở bảng 4.3 và hình 05:
Bảng 4.3. Kết quả ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng nhân nhanh
hồi Đảng sâm (sau 20 ngày nuôi cấy)
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
Nghiên cứu nhân giống in vitro cây Đảng Sâm (Codonopsis javanica ( Blume) Hook.f. Thomson (Khóa luận tốt nghiệp)
Sinh thái và bảo tồn đa dạng sinh học,Bảo tồn đa dạng sinh học,Đa dạng sinh học,Nghiên cứu,Nhân giống in vitro cây Đảng Sâm,Cây Đẳng sâm,Đẳng sâm
DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT.....................................................................v
MỤC LỤC .....................................................................................................................vi
PHẦN 1. MỞ ĐẦU.......................................................................................................1
1.1. Đặt vấn đề................................................................................................... 1
1.2. Mục đích nghiên cứu.................................................................................. 2
1.3. Mục tiêu nghiên cứu................................................................................... 2
1.4. Ý nghĩa của đề tài....................................................................................... 2
1.4.1.Ý nghĩa trong học tập và nghiên cứu khoa học ....................................... 2
1.4.2.Ý nghĩa thực tiễn...................................................................................... 3
PHẦN 2. TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU.................................................................4
2.1. Tổng quan về cây Đảng sâm ...................................................................... 4
2.1.1. Đặc điểm hình thái .................................................................................. 4
2.1.2. Giá trị của Đảng sâm............................................................................... 6
2.2. Khái quát về nuôi cấy mô tế bào thực vật.................................................. 7
2.2.1. Khái niệm ................................................................................................ 7
2.2.2. Cơ sở khoa học của nuôi cấy mô tế bào thực vật.................................... 7
2.2.3. Các giai đoạn của nhân giống vô tính in vitro ........................................ 9
2.3. Một số chất điều hòa sinh trưởng nuôi cấy mô tế bào thực vật ............... 10
2.3.1. Auxin..................................................................................................... 10
2.3.2. Cytokinin............................................................................................... 11
2.4. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây Đảng sâm . .................................. 12
PHẦN 3. ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU....13
3.1. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu............................................................ 13
3.2. Địa điểm, thời gian nghiên cứu................................................................ 13
3.3. Hóa chất và thiết bị .................................................................................. 13
3.4. Nội dung và phương pháp nghiên cứu..................................................... 13
3.4.1. Nội dung nghiên cứu............................................................................. 13
3.4.2. Phương pháp nghiên cứu....................................................................... 14
PHẦN 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN....................................21
4.1. Ảnh hưởng của thời gian khử trùng bằng NaClO 0,5%, HgCl2 0,1% đến
hiệu quả vô trùng vật liệu nuôi cấy chồi Đảng sâm................................... 21
4.2. Ảnh hưởng của môi trường MS, B5, WPhần mềm đến khả năng tái sinh chồi
Đảng sâm.................................................................................................... 23
4.3. Ảnh hưởng của các chất kích thích sinh trưởng đến khả năng nhân nhanh
chồi Đảng sâm............................................................................................ 26
4.3.1. Ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng nhân nhanh chồi Đảng sâm.. 26
4.3.2. Ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với Kinetin đến khả năng nhân
nhanh chồi
4.4.1. Ănh hưởng của nồng độ NAA đến khả năng ra rễ của Đảng sâm............... 31
4.4.2. Ảnh hưởng của nồng độ NAA kết hợp với IAA đến khả năng ra rễ của
Đảng sâm.................................................................................................... 33
PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ................................................................36
5.1. Kết luận .................................................................................................... 36
5.2. Kiến nghị.................................................................................................. 36
TÀI LIỆU THAM KHẢO........................................................................................37
PHỤ LỤC
PHẦN 1
MỞ ĐẦU
1.1. Đặt vấn đề
Sâm dây hay còn gọi là Đảng sâm (Codonopsis javanica ( Blume)
Hook.f.& Thomson.) là loại cây dược liệu có giá trị kinh tế. Đây là cây thuốc
quý, có tác dụng bổ ngũ tạng, nâng cao thể lực, tăng sức dẻo dai, tăng cường
khả năng miễn dịch cho cơ thể, có tác dụng ích huyết, sinh tân dịch, chống
mệt mỏi, giảm stress. Bộ phận dùng làm thuốc duy nhất của Đảng sâm là rễ.
Rễ cây Đảng sâm chứa saponins, triterpenes và steroid. Các hoạt chất có trong
Đảng sâm giúp cho các hoạt động trao đổi chất của cơ thể tốt hơn.
Ở Việt Nam Đảng sâm mọc rải rác ở các tỉnh miền núi phía Bắc. Trước đây
có nhiều ở một số tỉnh Lai Châu, Lào Cai, Hà Giang, Sơn La, Yên Bái, Tuyên
Quang, Cao Bằng, Lạng Sơn. Các tỉnh phía Nam chỉ thấy tập trung ở cao nguyên
Langbian (tỉnh Lâm Đồng) và xung quanh chân núi Ngọc Linh (Đắc Glây, Tu Mơ
Rông, tỉnh Kon Tum và Quảng Nam - Đà Nẵng). Tại Kon Tum, Sâm dây phân bố
chủ yếu ở vùng Ngọc Linh thuộc huyện Tu Mơ Rông và Đăkglei [3].
Đảng sâm đã được ghi trong Sách Đỏ Việt Nam (1996) với cấp đánh
giá "sẽ nguy cấp" (Bậc V) và Danh mục Thực vật rừng, Động vật rừng nguy
cấp, quý hiếm (nhóm 2) của Nghị định số 32/2006/NĐ - CP ngày 30/3/2006
của Chính phủ để hạn chế khai thác, sử dụng vì mục đích thương mại.
Do là loại cây dược liệu có giá trị kinh tế nên hiện nay người dân đang
khai thác theo cách tận thu, dẫn đến ngày càng khan hiếm trong tự nhiên.
Trong tương lai không xa, nguồn cây dược liệu mang tính đặt trưng của vùng
sẽ có nguy cơ cạn kiệt. Vì vậy, chủ động tạo nguồn giống phục vụ cho sản
xuất là vấn đề cấp thiết.
Theo phương pháp nhân giống cổ truyền, Đảng sâm được nhân giống
bằng cách gieo hạt, nhưng phương pháp này có nhiều nhược điểm, như việc
nhân giống mang tính thời vụ, khó tạo ra số lượng lớn theo yêu cầu của sản
xuất.. Ngày nay cùng với sự phát triển của khoa học kỹ thuật việc ứng dụng
nuôi cấy mô tế bào thực vật trong nhân giống đã trở nên phổ biến. Nuôi cấy
mô tế bào tạo ra những cây trồng sạch bệnh, chất lượng tốt, độ đồng đều cao,
hệ số nhân lớn và giữ được đặc tính di truyền của cây mẹ Nhận thức được vấn
đề bảo tồn và phát triển loài dược liệu quý tui tiến hành đề tài : “Nghiên cứu
nhân giống in- vitro cây Đảng sâm (Codonopsis javanica ( Blume)
Hook.f.& Thomson.)”
1.2. Mục đích nghiên cứu
Nhân nhanh được cây Đảng Sâm (Codonopsis javanica ( Blume)
Hook.f.& Thomson) bằng phương pháp in vitro.
1.3. Mục tiêu nghiên cứu
- Xác định được thời gian khử trùng bằng hóa chất khử trùng mang lại
hiệu quả cao nhất trong vô trùng vật liệu nuôi cấy chồi cây Đảng sâm.
- Xác định được môi trường nuôi cấy cơ bản đạt hiệu quả tái sinh chồi
cây Đảng sâm cao nhất.
- Xác định được nồng độ chất kích thích sinh trưởng đạt tỉ lệ nhân
nhanh chồi Đảng sâm cao nhất.
- Xác định được nồng độ chất kích sinh trưởng đạt tỉ lệ ra rễ của Đảng
sâm cao nhất.
1.4. Ý nghĩa của đề tài
1.4.1.Ý nghĩa trong học tập và nghiên cứu khoa học
- Kết quả nghiên cứu của đề tài đưa ra các bước nhân nhanh chồi Đảng
sâm bằng phương pháp in vitro phục vụ cho các nghiên cứu tiếp theo.
- Biết được phương pháp nghiên cứu một vấn đề khoa học, xử lý, phân
tích số liệu, trình bày một bài báo cáo khoa học.
1.4.2.Ý nghĩa thực tiễn
- Đề xuất được quy trình nhân giống Đảng sâm bằng phương pháp nuôi
cấy in vitro, để đảm bảo cung cấp số lượng lớn cây giống có chất lượng cao,
đồng đều cho sản xuất.
- Bảo tồn được loại dược liệu quý đang có nguy cơ tuyệt chủng.
Kết quả trên được giải thích như sau: Cả 3 loại môi trường MS, B5,
WPhần mềm đều chứa hàm lượng: khoáng đa lượng, vi lượng, vitamin, chất kích
thích sinh trưởng… Trong đó môi trường MS là môi trường giàu dinh dưỡng
môi trường B5 là môi trường trung bình và môi trường WPhần mềm là môi trường
cùng kiệt dinh dưỡng. Mặt khác Đảng sâm là loài sống trên thảm mục giàu hàm
lượng khoáng, chất hữu cơ… chúng sẽ phát triển rất tốt khi gặp môi trường
cung cấp đầy đủ các yếu tố trên.
Như vậy với 3 môi trường MS, B5, WPhần mềm thì môi trường MS thích hợp
nhất cho tái sinh chồi Đảng sâm, được sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo.
4.3. Ảnh hưởng của các chất kích thích sinh trưởng đến khả năng nhân
nhanh chồi Đảng sâm
4.3.1. Ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng nhân nhanh chồi Đảng sâm
BA là chất có khả năng phân chia tế bào mạnh mẽ và kích thích phát
sinh chồi bất định do vậy tui chọn chất này để thử nghiệm khả năng tái sinh
chồi của cây đảng sâm .Thí nghiệm được quan sát trong 20 ngày. Kết quả
nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng nhân nhanh chồi của
Đảng sâm được trình bày ở bảng 4.3 và hình 05:
Bảng 4.3. Kết quả ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng nhân nhanh
hồi Đảng sâm (sau 20 ngày nuôi cấy)
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
You must be registered for see links