Download Đề tài Thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa legumain
Giới thiệu chung về Enzyme
1.1.1 Định nghĩa
Trong cơ thể sống (các tế bào) luôn luôn xảy ra quá trình trao đổi chất. Sự trao đổi chất ngừng thì sự sống không tồn tại. Quá trình trao đổi của một chất là tập hợp các quy luật của rất nhiều các phản ứng hóa học khác nhau. Các phản ứng hóa học phức tạp này có liên quan chặt chẽ với nhau và điều chỉnh lẫn nhau. enzyme là các hợp chất protein xúc tác cho các phản ứng hóa học đó. Chúng có khả năng xúc tác đặc hiệu các phản ứng hóa học nhất định và đảm bảo cho các phản ứng xảy ra theo một chiều hướng nhất định với tốc độ nhịp nhàng trong cơ thể sống.[1]
Chúng có trong hầu hết các loại tế bào của cơ thể sống. Chính do những tác nhân xúc tác có nguồn gốc sinh học nên enzyme còn được gọi là các chất xúc tác sinh học (biocatalysators) nhằm để phân biệt với các chất xúc tác hóa học.[2]
1.1.2. Lịch sử nghiên cứu Enzyme
Do Enzyme học được coi như cột sống của hóa sinh học nên phần lớn các nghiên cứu hóa sinh từ trước đến nay đều liên quan nhiều đến enzyme.
Sự phất triển của enzyme có thể chia thành 4 giai đoạn [2]
- Giai đoạn 1: trước thế kỷ thứ XVII
- Giai đoạn 2: từ thế kỷ XVII đến nửa đầu của thế kỷ XX
- Giai đoạn 3: từ giữa thế kỷ XIX đến 30 năm đầu của thế kỷ XX
- Giai đoạn 4: từ ngững năm 30 của thế kỷ XX đến nay
1.1.2.1. Giai đoạn 1
Trước thế kỷ XVII người ta đã biết sử dụng các quá trình enzyme trong đời sống song chỉ có tính chất kinh nghiệm thực tế và thông qua hoạt động của vi sinh vật. Đó là các quá trình lên men rượu, muối dưa, làm tương và nước chấm Ở thời kỳ này người ta chưa hiểu về bản chất enzyme và các quá trình lên men [2]
1.1.2.2. Giai đoạn 2
Ở giai đoạn này các nhà bác học đã tiến hành tìm hiểu bản chất của các quá trình lên men. Thời kỳ này đã khái quát hiện tượng lên men như là hiện tượng phổ biến trong sự sống và enzyme là yếu tố gây nên sự chuyển hóa các chất trong quá trình lên men.
Vào những năm 1600 của thế kỷ XVII, Jan Baptista Van Helmont (Hà Lan, 1577 – 1644) là người đầu tiên tìm hiểu sâu bản chất của quá trình lên men. Van Helmont đã nhận thấy bản chất của sự tiêu hóa là sự chuyển hóa hóa học của thức ăn và giải thích cơ chế của nó với sự so sánh nó với quá trình lên men rượu. Danh từ ‘ferment’ được Van helmont dùng để chỉ tác nhân gây ra sự chuyển biến các chất trong quá trinh lên men rượu.
++ Ai muốn tải bản DOC Đầy Đủ thì Trả lời bài viết này, mình sẽ gửi Link download cho!
Bệnh ung thư được coi là một trong những chứng bệnh nan y nguy hiểm được phát hiện với số ca mắc bệnh ngày càng gia tăng trên thế giới. Không ít giả thuyết cho rằng, ung thư là căn bệnh phát sinh do lối sống, lối sinh hoạt thiếu khoa học của con người. Song phải chăng ung thư là căn bệnh hiện đại?
Với số lượng bệnh nhân được phát hiện là mắc bệnh ung thư và số ca tử vong do ung thư tăng đột biến trong một vài năm gầm đây, ung thư đã được xem là căn bệnh của xã hội thời hiện đại. Ts.Roaslie David – trường đại học Manchester – Anh và Ts.Michael Zimmermann – trường đại học Villanova trong nghiên cứu của mình đã khẳng định: cuộc sống xã hội thời hiện đại đã góp phần đẩy mạnh sự hình thành của nhiều yếu tố gây ung thư.
Theo dự báo của các nhà khoa học Anh, thế kỷ 21, ung thư tiếp tục là căn bệnh có tỉ lệ tử vong cao trên thế giới. Khoa học vẫn chưa thể tìm ra cách điều trị dứt điểm các trường hợp khối u ác tính, và ung thư cẫn được xem là căn bệnh nan y khó chữa.
Theo thống kê của Tổ chức ung thư Liên hợp quốc, tới năm 2030, số các trường hợp mắc ung thư trên thế giới sẽ tăng gấp nhiều lần con số hiện nay và số các trường hợp tử vong do ung thư sẽ nhiều gấp đôi con số đã được thống kê trên thế gới vào năm 2008. Theo ước tính này, số người bị tử vong do ung thư sẽ lên tới khoảng hơn 13,2 triệu người vào năm 2030. Hiệp hội nghiên cứu ung thư quốc tế - IARC cũng cho biết, khoảng 21,4 triệu trường hợp mắc mới ung thư sẽ được phát hiện vào năm 2030 và sẽ tập trung chủ yếu tại các nước nghèo, nơi có mức sống thấp và tỉ lệ mắc bệnh cao nhất thế giới. Lý giải cho việc số ca tử vong do ung thư sẽ tăng lên trong tương lai, các nhà khoa học cho rằng, do điều kiện sống thay đổi, thói quen sinh hoạt, kèm theo đó là sự thay đổi khí hậu toàn cầu dẫn tới sự khắc nghiệt của thời tiết, môi trường bị ô nhiễm nặng nề. Nồng độ các phân tử phóng xạ tự do trong môi trường tăng cao khiến cho nguy cơ tiếp xúc với lượng phóng xạ gia tăng và là điều kiện thuận lợi cho sự xuất hiện của bệnh nhân ung thư.
Ung thư là một vấn nạn nghiêm trọng của con người nên việc điều trị ung thư rất quan trọng trong chương trình Phòng chống ung thư ở mọi quốc gia. Muốn nâng cao chất lượng điều trị, không chỉ hoàn chỉnh về kĩ thuật của mỗi phương pháp, thiết bị, mà còn phải có kinh nghiệm, kiến thức, chẩn đoán chính xác, xây dựng phác đồ điều trị cho mỗi bệnh nhân một cách hợp lý nhất. Các phương pháp điều trị hiện nay như:
- Phương pháp điều trị tại chỗ: Phẫu thuật và tia xạ, có khả năng điều trị triệt để khi bệnh còn ở giai đoạn sớm, tổn thương ung thư chỉ khu chú ở tại chỗ hay tại vùng.
- Các phương pháp điều trị toàn thân: Điều trị hóa chất, điều trị nội tiết, điều trị miễn dịch…
- Ngoài các phương pháp điều trị trên hiện nay có rất nhiều nhà nghiên cứu đã ứng dụng enzyme trong điều trị ung thư ví dụ như: Chuyển 1 gen mã hóa enzyme để chuyển hóa thuốc chuyên dụng thành chất gây chết tế bào ung thư, hay sử dụng kháng thể có gắn một enzyme chuyển hóa thuốc chuyên dụng thành chất gây độc tế bào. Legumain là một trong nhiều enzyme đã và đang được ứng dụng nhiều trong y học. Legumain được biểu hiện cao ở một số loại khối u, chẳng hạn như tuyến tiền liệt, đại tràng và ung thư vú. Ngoài ra, nó còn được biểu hiện cao trong ung thư đại tràng. Do đó chúng tui tiến hành thực hiện đề tài “Thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa legumain”. Nhằm mục đích sản xuất legumain với lượng lớn để phục vụ cho y học.
CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Giới thiệu chung về Enzyme
1.1.1 Định nghĩa
Trong cơ thể sống (các tế bào) luôn luôn xảy ra quá trình trao đổi chất. Sự trao đổi chất ngừng thì sự sống không tồn tại. Quá trình trao đổi của một chất là tập hợp các quy luật của rất nhiều các phản ứng hóa học khác nhau. Các phản ứng hóa học phức tạp này có liên quan chặt chẽ với nhau và điều chỉnh lẫn nhau. enzyme là các hợp chất protein xúc tác cho các phản ứng hóa học đó. Chúng có khả năng xúc tác đặc hiệu các phản ứng hóa học nhất định và đảm bảo cho các phản ứng xảy ra theo một chiều hướng nhất định với tốc độ nhịp nhàng trong cơ thể sống.[1]
Chúng có trong hầu hết các loại tế bào của cơ thể sống. Chính do những tác nhân xúc tác có nguồn gốc sinh học nên enzyme còn được gọi là các chất xúc tác sinh học (biocatalysators) nhằm để phân biệt với các chất xúc tác hóa học.[2]
1.1.2. Lịch sử nghiên cứu Enzyme
Do Enzyme học được coi như cột sống của hóa sinh học nên phần lớn các nghiên cứu hóa sinh từ trước đến nay đều liên quan nhiều đến enzyme.
Sự phất triển của enzyme có thể chia thành 4 giai đoạn [2]
Giai đoạn 1: trước thế kỷ thứ XVII
Giai đoạn 2: từ thế kỷ XVII đến nửa đầu của thế kỷ XX
Giai đoạn 3: từ giữa thế kỷ XIX đến 30 năm đầu của thế kỷ XX
Giai đoạn 4: từ ngững năm 30 của thế kỷ XX đến nay
1.1.2.1. Giai đoạn 1
Trước thế kỷ XVII người ta đã biết sử dụng các quá trình enzyme trong đời sống song chỉ có tính chất kinh nghiệm thực tế và thông qua hoạt động của vi sinh vật. Đó là các quá trình lên men rượu, muối dưa, làm tương và nước chấm… Ở thời kỳ này người ta chưa hiểu về bản chất enzyme và các quá trình lên men…[2]
1.1.2.2. Giai đoạn 2
Ở giai đoạn này các nhà bác học đã tiến hành tìm hiểu bản chất của các quá trình lên men. Thời kỳ này đã khái quát hiện tượng lên men như là hiện tượng phổ biến trong sự sống và enzyme là yếu tố gây nên sự chuyển hóa các chất trong quá trình lên men.
Vào những năm 1600 của thế kỷ XVII, Jan Baptista Van Helmont (Hà Lan, 1577 – 1644) là người đầu tiên tìm hiểu sâu bản chất của quá trình lên men. Van Helmont đã nhận thấy bản chất của sự tiêu hóa là sự chuyển hóa hóa học của thức ăn và giải thích cơ chế của nó với sự so sánh nó với quá trình lên men rượu. Danh từ ‘ferment’ được Van helmont dùng để chỉ tác nhân gây ra sự chuyển biến các chất trong quá trinh lên men rượu.
Vào nửa cuối thế kỷ thứ XVIII, nhà tự nhiên học người Pháp là Réaumur cũng đã nghiên cứu bản chất của sự tiêu hóa. Ông đã nghiên cứu trên vật thí nghiệm là chim quạ đen.
Đầu thế kỷ XIX, các nhà nghiên cứu đã tách được các chất gây ra quá trình lên men. Năm 1814 Kirchoff, viện sỹ Saint Petercburg đã phát hiện amylase trong mầm đại mạch.
Năm 1833, hai nhà khoa học người Pháp là Payen và Pessoz đã chứng minh chất có hoạt động phân giải tinh bột thành đường có thể tách được ở dạng bột. Tiếp đó người ta đã tìm ra và tách được nhiều Enzyme khác như Enzyme phân giải protein của dich tiêu hóa trong dạ dày như Pepsin.
Sau đó, lý thuyết xúc tác đã ra đời. Năm 1835, nhà khoa học Berzelius (nhà hóa học Thụy Điển) có quan điểm cho rằng tăng tốc độ phản ứng là hiện tượng xúc tác. Đây là một quan điểm đúng. Song tiếc cho nhà khoa học này đã coi các chất xúc tác này hoạt động được là do “ lực sống” không theo điều khiển của con người. Đây là quan điểm duy tâm, siêu hình đã làm trì trệ sự phá...
Download Đề tài Thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa legumain miễn phí
Giới thiệu chung về Enzyme
1.1.1 Định nghĩa
Trong cơ thể sống (các tế bào) luôn luôn xảy ra quá trình trao đổi chất. Sự trao đổi chất ngừng thì sự sống không tồn tại. Quá trình trao đổi của một chất là tập hợp các quy luật của rất nhiều các phản ứng hóa học khác nhau. Các phản ứng hóa học phức tạp này có liên quan chặt chẽ với nhau và điều chỉnh lẫn nhau. enzyme là các hợp chất protein xúc tác cho các phản ứng hóa học đó. Chúng có khả năng xúc tác đặc hiệu các phản ứng hóa học nhất định và đảm bảo cho các phản ứng xảy ra theo một chiều hướng nhất định với tốc độ nhịp nhàng trong cơ thể sống.[1]
Chúng có trong hầu hết các loại tế bào của cơ thể sống. Chính do những tác nhân xúc tác có nguồn gốc sinh học nên enzyme còn được gọi là các chất xúc tác sinh học (biocatalysators) nhằm để phân biệt với các chất xúc tác hóa học.[2]
1.1.2. Lịch sử nghiên cứu Enzyme
Do Enzyme học được coi như cột sống của hóa sinh học nên phần lớn các nghiên cứu hóa sinh từ trước đến nay đều liên quan nhiều đến enzyme.
Sự phất triển của enzyme có thể chia thành 4 giai đoạn [2]
- Giai đoạn 1: trước thế kỷ thứ XVII
- Giai đoạn 2: từ thế kỷ XVII đến nửa đầu của thế kỷ XX
- Giai đoạn 3: từ giữa thế kỷ XIX đến 30 năm đầu của thế kỷ XX
- Giai đoạn 4: từ ngững năm 30 của thế kỷ XX đến nay
1.1.2.1. Giai đoạn 1
Trước thế kỷ XVII người ta đã biết sử dụng các quá trình enzyme trong đời sống song chỉ có tính chất kinh nghiệm thực tế và thông qua hoạt động của vi sinh vật. Đó là các quá trình lên men rượu, muối dưa, làm tương và nước chấm Ở thời kỳ này người ta chưa hiểu về bản chất enzyme và các quá trình lên men [2]
1.1.2.2. Giai đoạn 2
Ở giai đoạn này các nhà bác học đã tiến hành tìm hiểu bản chất của các quá trình lên men. Thời kỳ này đã khái quát hiện tượng lên men như là hiện tượng phổ biến trong sự sống và enzyme là yếu tố gây nên sự chuyển hóa các chất trong quá trình lên men.
Vào những năm 1600 của thế kỷ XVII, Jan Baptista Van Helmont (Hà Lan, 1577 – 1644) là người đầu tiên tìm hiểu sâu bản chất của quá trình lên men. Van Helmont đã nhận thấy bản chất của sự tiêu hóa là sự chuyển hóa hóa học của thức ăn và giải thích cơ chế của nó với sự so sánh nó với quá trình lên men rượu. Danh từ ‘ferment’ được Van helmont dùng để chỉ tác nhân gây ra sự chuyển biến các chất trong quá trinh lên men rượu.
++ Ai muốn tải bản DOC Đầy Đủ thì Trả lời bài viết này, mình sẽ gửi Link download cho!
Tóm tắt nội dung:
MỞ ĐẦUBệnh ung thư được coi là một trong những chứng bệnh nan y nguy hiểm được phát hiện với số ca mắc bệnh ngày càng gia tăng trên thế giới. Không ít giả thuyết cho rằng, ung thư là căn bệnh phát sinh do lối sống, lối sinh hoạt thiếu khoa học của con người. Song phải chăng ung thư là căn bệnh hiện đại?
Với số lượng bệnh nhân được phát hiện là mắc bệnh ung thư và số ca tử vong do ung thư tăng đột biến trong một vài năm gầm đây, ung thư đã được xem là căn bệnh của xã hội thời hiện đại. Ts.Roaslie David – trường đại học Manchester – Anh và Ts.Michael Zimmermann – trường đại học Villanova trong nghiên cứu của mình đã khẳng định: cuộc sống xã hội thời hiện đại đã góp phần đẩy mạnh sự hình thành của nhiều yếu tố gây ung thư.
Theo dự báo của các nhà khoa học Anh, thế kỷ 21, ung thư tiếp tục là căn bệnh có tỉ lệ tử vong cao trên thế giới. Khoa học vẫn chưa thể tìm ra cách điều trị dứt điểm các trường hợp khối u ác tính, và ung thư cẫn được xem là căn bệnh nan y khó chữa.
Theo thống kê của Tổ chức ung thư Liên hợp quốc, tới năm 2030, số các trường hợp mắc ung thư trên thế giới sẽ tăng gấp nhiều lần con số hiện nay và số các trường hợp tử vong do ung thư sẽ nhiều gấp đôi con số đã được thống kê trên thế gới vào năm 2008. Theo ước tính này, số người bị tử vong do ung thư sẽ lên tới khoảng hơn 13,2 triệu người vào năm 2030. Hiệp hội nghiên cứu ung thư quốc tế - IARC cũng cho biết, khoảng 21,4 triệu trường hợp mắc mới ung thư sẽ được phát hiện vào năm 2030 và sẽ tập trung chủ yếu tại các nước nghèo, nơi có mức sống thấp và tỉ lệ mắc bệnh cao nhất thế giới. Lý giải cho việc số ca tử vong do ung thư sẽ tăng lên trong tương lai, các nhà khoa học cho rằng, do điều kiện sống thay đổi, thói quen sinh hoạt, kèm theo đó là sự thay đổi khí hậu toàn cầu dẫn tới sự khắc nghiệt của thời tiết, môi trường bị ô nhiễm nặng nề. Nồng độ các phân tử phóng xạ tự do trong môi trường tăng cao khiến cho nguy cơ tiếp xúc với lượng phóng xạ gia tăng và là điều kiện thuận lợi cho sự xuất hiện của bệnh nhân ung thư.
Ung thư là một vấn nạn nghiêm trọng của con người nên việc điều trị ung thư rất quan trọng trong chương trình Phòng chống ung thư ở mọi quốc gia. Muốn nâng cao chất lượng điều trị, không chỉ hoàn chỉnh về kĩ thuật của mỗi phương pháp, thiết bị, mà còn phải có kinh nghiệm, kiến thức, chẩn đoán chính xác, xây dựng phác đồ điều trị cho mỗi bệnh nhân một cách hợp lý nhất. Các phương pháp điều trị hiện nay như:
- Phương pháp điều trị tại chỗ: Phẫu thuật và tia xạ, có khả năng điều trị triệt để khi bệnh còn ở giai đoạn sớm, tổn thương ung thư chỉ khu chú ở tại chỗ hay tại vùng.
- Các phương pháp điều trị toàn thân: Điều trị hóa chất, điều trị nội tiết, điều trị miễn dịch…
- Ngoài các phương pháp điều trị trên hiện nay có rất nhiều nhà nghiên cứu đã ứng dụng enzyme trong điều trị ung thư ví dụ như: Chuyển 1 gen mã hóa enzyme để chuyển hóa thuốc chuyên dụng thành chất gây chết tế bào ung thư, hay sử dụng kháng thể có gắn một enzyme chuyển hóa thuốc chuyên dụng thành chất gây độc tế bào. Legumain là một trong nhiều enzyme đã và đang được ứng dụng nhiều trong y học. Legumain được biểu hiện cao ở một số loại khối u, chẳng hạn như tuyến tiền liệt, đại tràng và ung thư vú. Ngoài ra, nó còn được biểu hiện cao trong ung thư đại tràng. Do đó chúng tui tiến hành thực hiện đề tài “Thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa legumain”. Nhằm mục đích sản xuất legumain với lượng lớn để phục vụ cho y học.
CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Giới thiệu chung về Enzyme
1.1.1 Định nghĩa
Trong cơ thể sống (các tế bào) luôn luôn xảy ra quá trình trao đổi chất. Sự trao đổi chất ngừng thì sự sống không tồn tại. Quá trình trao đổi của một chất là tập hợp các quy luật của rất nhiều các phản ứng hóa học khác nhau. Các phản ứng hóa học phức tạp này có liên quan chặt chẽ với nhau và điều chỉnh lẫn nhau. enzyme là các hợp chất protein xúc tác cho các phản ứng hóa học đó. Chúng có khả năng xúc tác đặc hiệu các phản ứng hóa học nhất định và đảm bảo cho các phản ứng xảy ra theo một chiều hướng nhất định với tốc độ nhịp nhàng trong cơ thể sống.[1]
Chúng có trong hầu hết các loại tế bào của cơ thể sống. Chính do những tác nhân xúc tác có nguồn gốc sinh học nên enzyme còn được gọi là các chất xúc tác sinh học (biocatalysators) nhằm để phân biệt với các chất xúc tác hóa học.[2]
1.1.2. Lịch sử nghiên cứu Enzyme
Do Enzyme học được coi như cột sống của hóa sinh học nên phần lớn các nghiên cứu hóa sinh từ trước đến nay đều liên quan nhiều đến enzyme.
Sự phất triển của enzyme có thể chia thành 4 giai đoạn [2]
Giai đoạn 1: trước thế kỷ thứ XVII
Giai đoạn 2: từ thế kỷ XVII đến nửa đầu của thế kỷ XX
Giai đoạn 3: từ giữa thế kỷ XIX đến 30 năm đầu của thế kỷ XX
Giai đoạn 4: từ ngững năm 30 của thế kỷ XX đến nay
1.1.2.1. Giai đoạn 1
Trước thế kỷ XVII người ta đã biết sử dụng các quá trình enzyme trong đời sống song chỉ có tính chất kinh nghiệm thực tế và thông qua hoạt động của vi sinh vật. Đó là các quá trình lên men rượu, muối dưa, làm tương và nước chấm… Ở thời kỳ này người ta chưa hiểu về bản chất enzyme và các quá trình lên men…[2]
1.1.2.2. Giai đoạn 2
Ở giai đoạn này các nhà bác học đã tiến hành tìm hiểu bản chất của các quá trình lên men. Thời kỳ này đã khái quát hiện tượng lên men như là hiện tượng phổ biến trong sự sống và enzyme là yếu tố gây nên sự chuyển hóa các chất trong quá trình lên men.
Vào những năm 1600 của thế kỷ XVII, Jan Baptista Van Helmont (Hà Lan, 1577 – 1644) là người đầu tiên tìm hiểu sâu bản chất của quá trình lên men. Van Helmont đã nhận thấy bản chất của sự tiêu hóa là sự chuyển hóa hóa học của thức ăn và giải thích cơ chế của nó với sự so sánh nó với quá trình lên men rượu. Danh từ ‘ferment’ được Van helmont dùng để chỉ tác nhân gây ra sự chuyển biến các chất trong quá trinh lên men rượu.
Vào nửa cuối thế kỷ thứ XVIII, nhà tự nhiên học người Pháp là Réaumur cũng đã nghiên cứu bản chất của sự tiêu hóa. Ông đã nghiên cứu trên vật thí nghiệm là chim quạ đen.
Đầu thế kỷ XIX, các nhà nghiên cứu đã tách được các chất gây ra quá trình lên men. Năm 1814 Kirchoff, viện sỹ Saint Petercburg đã phát hiện amylase trong mầm đại mạch.
Năm 1833, hai nhà khoa học người Pháp là Payen và Pessoz đã chứng minh chất có hoạt động phân giải tinh bột thành đường có thể tách được ở dạng bột. Tiếp đó người ta đã tìm ra và tách được nhiều Enzyme khác như Enzyme phân giải protein của dich tiêu hóa trong dạ dày như Pepsin.
Sau đó, lý thuyết xúc tác đã ra đời. Năm 1835, nhà khoa học Berzelius (nhà hóa học Thụy Điển) có quan điểm cho rằng tăng tốc độ phản ứng là hiện tượng xúc tác. Đây là một quan điểm đúng. Song tiếc cho nhà khoa học này đã coi các chất xúc tác này hoạt động được là do “ lực sống” không theo điều khiển của con người. Đây là quan điểm duy tâm, siêu hình đã làm trì trệ sự phá...