Link tải luận văn miễn phí cho ae Kết nối
Trang
Lời cam đoan . i
Lời Thank ii
Mục lục . iii
Những chữ viết tắt . vi
Danh mục các bảng . vii
Danh mục các hình . viii
MỞ ĐẦU . 1
Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU . 3
1.1.CÂY NGÔ . 3
1.1.1.Nguồn gốc và phân loại cây ngô . 3
1.1.2.Đặc điểm nông sinh học của cây ngô . 3
1.1.3.Vai trò cây ngô trong nền kinh tế . 5
1.1.4.Đặc điểm hóa sinh hạt ngô . 7
1.1.5.Tình hình sản xuất ngô trên thế giới và ở Việt Nam . 8
1.1.5.1.Tình hình sản xuất ngô trên thế giới . 8
1.1.5.2.Tình hình sản xuất ngô ở Việt Nam . 12
1.2. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TÍNH ĐA DẠNG DI TRUYỀN Ở THỰC VẬT . 13
1.2.1.Một số phương pháp sinh học phân tử sử dụng trong nghiên cứu
quan hệ di truyền thực vật . 13
1.2.1.1.Kỹ thuật RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphisms –
đa hình độ dài các đoạn cắt giới hạn) 14
1.2.1.2. Kỹ thuật AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism – đa
1.2.1.3. Kỹ thuật SSR (Simple Sequence Repeat – trình tự lặp lại đơn giản) . 15
1.2.1.4. Bản đồ QTL (Quantiative Trait loci) 17
1.2.1.5. Kỹ thuật RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) . 17
1.2.2. Nghiên cứu sự đa dạng di truyền ở thực vật bằng kỹ thuật RAPD.20
1.2.3.Tình hình nghiên cứu sự đa dạng di truyền của ngô bằng kỹ thuật RAPD. 22
1.3. NHẬN XÉT CHUNG . 24
Chương 2 . VẬT LIỆU VÀ PHưƠNG PHÁP . 25
2.1.VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU . 25
2.1.1.Vật liệu thực vật . 25
2.1.2.Hoá chất . 25
2.1.3.Thiết bị . 26
2.2. PHưƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 26
2.2.1.Phương pháp hóa sinh . 26
2.2.1.1.Xác định hàm lượng lipid . 26
2.2.1.2.Xác định hàm lượng protein . 26
2.2.1.3.Xác định hàm lượng đường tan. 27
2.2.2.Phương pháp sinh học phân tử. 27
2.2.2.1.Phương pháp tách DNA từ lá non của ngô. 27
2.2.2.2.Phương pháp xác định hàm lượng và độ tinh sạch DNA tổng số. 28
2.2.2.3.Phản ứng RAPD. 29
2.2.2.4.Phương pháp xử lý kết quả và tính toán số liệu. 30
Chương 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN. 31
3.1. ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI, HÓA SINH HẠT CỦA CÁC GIỐNG
NGÔ NGHIÊN CỨU. 31
3.1.1.Đặc điểm hình thái của 14 giống ngô nghiên cứu. 31
3.1.2.Hàm lượng protein, lipid, đường của 14 giống ngô nghiên cứu. 32
3. 2. PHÂN TÍCH TÍNH ĐA HÌNH DNA BẰNG KỸ THUẬT RAPD. 35
3.2.1.Kết quả tách chiết DNA tổng số từ lá ngô. 35
3.2.2.Kết quả nghiên cứu đa hình DNA bằng kỹ thuật RAPD. 37
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ. 50
CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN. 51
TÀI LIỆU THAM KHẢO. 52
MỞ ĐẦU
1. Lý do chọn đề tài
Cây ngô có tên khoa học là Zea mays L. và có nguồn gốc từ Trung Mỹ.
Ngô là cây lương thực quan trọng trong nền kinh tế toàn cầu. Ở các nước
thuộc Trung Mỹ, Nam Á và Châu Phi, người ta sử dụng ngô làm lương thực
chính. Không những thế, ngô còn là cây cung cấp thức ăn chăn nuôi quan
trọng nhất hiện nay: 70% chất tinh trong thức ăn tổng hợp của gia súc là từ
ngô (Ngô Hữu Tình, 2003) [18]. Ngô không chỉ cung cấp lương thực cho con
người, phát triển chăn nuôi, ngô còn là nguyên liệu cho ngành công nghiệp
chế biến trên toàn thế giới. Hiện nay, diện tích ngô trên thế giới vào khoảng
135 - 140 triệu ha, với sản lượng trung bình là 600 - 700 triệu tấn.
Ở Việt Nam, ngô là cây lương thực quan trọng thứ hai sau lúa của nông
dân vùng trung du và miền núi phía Bắc nói chung và cây lương thực chính
của đồng bào dân tộc thiểu số vùng cao nói riêng [1]. Trong những năm gần
đây sản xuất ngô ở Việt Nam tăng lên nhanh nhờ sự thúc đẩy của ngành chăn
nuôi và công nghiệp chế biến. Đặc biệt từ những năm 1990 trở lại đây, diện
tích, năng suất và sản lượng ngô tăng liên tục là nhờ ứng dụng những tiến bộ
khoa học kỹ thuật mới vào sản xuất mà tiêu biểu là đưa ngô lai vào trồng trên
diện tích rộng. Các giống ngô ở nước ta hiện nay rất phong phú gồm các
giống ngô nhập nội, giống lai tạo, giống tổng hợp, giống đột biến và các
giống ngô địa phương [20].
Bên cạnh các giống ngô lai có năng suất cao đang được trồng phổ biến ở
nhiều vùng trong cả nước, thì các giống ngô địa phương tuy có năng suất thấp
nhưng chất lượng hạt cao, chất lượng ngô dẻo, thơm, ngon và chống chịu sâu
bệnh tốt.
Hiện nay, có rất nhiều phương pháp để nghiên cứu sự đa dạng di truyền
của các giống cây trồng nói chung và cây ngô nói riêng như RFLP, AFLP,
SSR, STS, RAPD,... Các phương pháp này khắc phục được nhược điểm của
các phương pháp chọn giống truyền thống bởi đánh giá được hệ gen của cây
trồng.
Những năm gần đây, diện tích trồng các giống ngô địa phương ngày
càng có xu hướng giảm, nhiều giống ngô nếp quý hiếm sẽ bị mất dần. Như
vậy, việc sưu tập và nghiên cứu các giống ngô nếp địa phương góp phần bảo
tồn nguồn gen cây ngô là rất cần thiết.
Nghiên cứu sự đa dạng di truyền ở mức DNA và đặc điểm hóa sinh ở
giai đoạn hạt là cơ sở khoa học để đề xuất việc chọn những giống ngô có năng
suất cao và chất lượng tốt góp phần bảo tồn, phát triển nguồn gen cây ngô. Từ
đó tuyển chọn giống ngô thích hợp làm vật liệu chọn giống là những vấn đề rất
được quan tâm nghiên cứu. Xuất phát từ lý do trên, chúng tui tiến hành thực
hiện đề tài: “Nghiên cứu tính đa dạng di truyền của một số giống ngô (Zea
mays L.)”
2. Mục tiêu nghiên cứu
- Đánh giá chất lượng hạt của một số giống ngô nếp địa phương (Zea mays L.)
- Khảo sát sự đa dạng và mối quan hệ di truyền của 14 giống ngô bằng kỹ thuật
RAPD.
3. Nội dung nghiên cứu
- Phân tích đặc điểm hình thái, khối lượng và kích thước hạt của một số
giống ngô nếp địa phương.
- Xác định hàm lượng lipid, protein, đường trong hạt của các giống ngô
nghiên cứu.
- Phân tích sự đa hình DNA được nhân bản ngẫu nhiên, xác định mức sai
khác trong cấu trúc DNA hệ gen của các giống ngô nghiên cứu.
- Thiết lập mối quan hệ di truyền của 14 giống ngô.
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
Trang
Lời cam đoan . i
Lời Thank ii
Mục lục . iii
Những chữ viết tắt . vi
Danh mục các bảng . vii
Danh mục các hình . viii
MỞ ĐẦU . 1
Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU . 3
1.1.CÂY NGÔ . 3
1.1.1.Nguồn gốc và phân loại cây ngô . 3
1.1.2.Đặc điểm nông sinh học của cây ngô . 3
1.1.3.Vai trò cây ngô trong nền kinh tế . 5
1.1.4.Đặc điểm hóa sinh hạt ngô . 7
1.1.5.Tình hình sản xuất ngô trên thế giới và ở Việt Nam . 8
1.1.5.1.Tình hình sản xuất ngô trên thế giới . 8
1.1.5.2.Tình hình sản xuất ngô ở Việt Nam . 12
1.2. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TÍNH ĐA DẠNG DI TRUYỀN Ở THỰC VẬT . 13
1.2.1.Một số phương pháp sinh học phân tử sử dụng trong nghiên cứu
quan hệ di truyền thực vật . 13
1.2.1.1.Kỹ thuật RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphisms –
đa hình độ dài các đoạn cắt giới hạn) 14
1.2.1.2. Kỹ thuật AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism – đa
1.2.1.3. Kỹ thuật SSR (Simple Sequence Repeat – trình tự lặp lại đơn giản) . 15
1.2.1.4. Bản đồ QTL (Quantiative Trait loci) 17
1.2.1.5. Kỹ thuật RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) . 17
1.2.2. Nghiên cứu sự đa dạng di truyền ở thực vật bằng kỹ thuật RAPD.20
1.2.3.Tình hình nghiên cứu sự đa dạng di truyền của ngô bằng kỹ thuật RAPD. 22
1.3. NHẬN XÉT CHUNG . 24
Chương 2 . VẬT LIỆU VÀ PHưƠNG PHÁP . 25
2.1.VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU . 25
2.1.1.Vật liệu thực vật . 25
2.1.2.Hoá chất . 25
2.1.3.Thiết bị . 26
2.2. PHưƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 26
2.2.1.Phương pháp hóa sinh . 26
2.2.1.1.Xác định hàm lượng lipid . 26
2.2.1.2.Xác định hàm lượng protein . 26
2.2.1.3.Xác định hàm lượng đường tan. 27
2.2.2.Phương pháp sinh học phân tử. 27
2.2.2.1.Phương pháp tách DNA từ lá non của ngô. 27
2.2.2.2.Phương pháp xác định hàm lượng và độ tinh sạch DNA tổng số. 28
2.2.2.3.Phản ứng RAPD. 29
2.2.2.4.Phương pháp xử lý kết quả và tính toán số liệu. 30
Chương 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN. 31
3.1. ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI, HÓA SINH HẠT CỦA CÁC GIỐNG
NGÔ NGHIÊN CỨU. 31
3.1.1.Đặc điểm hình thái của 14 giống ngô nghiên cứu. 31
3.1.2.Hàm lượng protein, lipid, đường của 14 giống ngô nghiên cứu. 32
3. 2. PHÂN TÍCH TÍNH ĐA HÌNH DNA BẰNG KỸ THUẬT RAPD. 35
3.2.1.Kết quả tách chiết DNA tổng số từ lá ngô. 35
3.2.2.Kết quả nghiên cứu đa hình DNA bằng kỹ thuật RAPD. 37
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ. 50
CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN. 51
TÀI LIỆU THAM KHẢO. 52
MỞ ĐẦU
1. Lý do chọn đề tài
Cây ngô có tên khoa học là Zea mays L. và có nguồn gốc từ Trung Mỹ.
Ngô là cây lương thực quan trọng trong nền kinh tế toàn cầu. Ở các nước
thuộc Trung Mỹ, Nam Á và Châu Phi, người ta sử dụng ngô làm lương thực
chính. Không những thế, ngô còn là cây cung cấp thức ăn chăn nuôi quan
trọng nhất hiện nay: 70% chất tinh trong thức ăn tổng hợp của gia súc là từ
ngô (Ngô Hữu Tình, 2003) [18]. Ngô không chỉ cung cấp lương thực cho con
người, phát triển chăn nuôi, ngô còn là nguyên liệu cho ngành công nghiệp
chế biến trên toàn thế giới. Hiện nay, diện tích ngô trên thế giới vào khoảng
135 - 140 triệu ha, với sản lượng trung bình là 600 - 700 triệu tấn.
Ở Việt Nam, ngô là cây lương thực quan trọng thứ hai sau lúa của nông
dân vùng trung du và miền núi phía Bắc nói chung và cây lương thực chính
của đồng bào dân tộc thiểu số vùng cao nói riêng [1]. Trong những năm gần
đây sản xuất ngô ở Việt Nam tăng lên nhanh nhờ sự thúc đẩy của ngành chăn
nuôi và công nghiệp chế biến. Đặc biệt từ những năm 1990 trở lại đây, diện
tích, năng suất và sản lượng ngô tăng liên tục là nhờ ứng dụng những tiến bộ
khoa học kỹ thuật mới vào sản xuất mà tiêu biểu là đưa ngô lai vào trồng trên
diện tích rộng. Các giống ngô ở nước ta hiện nay rất phong phú gồm các
giống ngô nhập nội, giống lai tạo, giống tổng hợp, giống đột biến và các
giống ngô địa phương [20].
Bên cạnh các giống ngô lai có năng suất cao đang được trồng phổ biến ở
nhiều vùng trong cả nước, thì các giống ngô địa phương tuy có năng suất thấp
nhưng chất lượng hạt cao, chất lượng ngô dẻo, thơm, ngon và chống chịu sâu
bệnh tốt.
Hiện nay, có rất nhiều phương pháp để nghiên cứu sự đa dạng di truyền
của các giống cây trồng nói chung và cây ngô nói riêng như RFLP, AFLP,
SSR, STS, RAPD,... Các phương pháp này khắc phục được nhược điểm của
các phương pháp chọn giống truyền thống bởi đánh giá được hệ gen của cây
trồng.
Những năm gần đây, diện tích trồng các giống ngô địa phương ngày
càng có xu hướng giảm, nhiều giống ngô nếp quý hiếm sẽ bị mất dần. Như
vậy, việc sưu tập và nghiên cứu các giống ngô nếp địa phương góp phần bảo
tồn nguồn gen cây ngô là rất cần thiết.
Nghiên cứu sự đa dạng di truyền ở mức DNA và đặc điểm hóa sinh ở
giai đoạn hạt là cơ sở khoa học để đề xuất việc chọn những giống ngô có năng
suất cao và chất lượng tốt góp phần bảo tồn, phát triển nguồn gen cây ngô. Từ
đó tuyển chọn giống ngô thích hợp làm vật liệu chọn giống là những vấn đề rất
được quan tâm nghiên cứu. Xuất phát từ lý do trên, chúng tui tiến hành thực
hiện đề tài: “Nghiên cứu tính đa dạng di truyền của một số giống ngô (Zea
mays L.)”
2. Mục tiêu nghiên cứu
- Đánh giá chất lượng hạt của một số giống ngô nếp địa phương (Zea mays L.)
- Khảo sát sự đa dạng và mối quan hệ di truyền của 14 giống ngô bằng kỹ thuật
RAPD.
3. Nội dung nghiên cứu
- Phân tích đặc điểm hình thái, khối lượng và kích thước hạt của một số
giống ngô nếp địa phương.
- Xác định hàm lượng lipid, protein, đường trong hạt của các giống ngô
nghiên cứu.
- Phân tích sự đa hình DNA được nhân bản ngẫu nhiên, xác định mức sai
khác trong cấu trúc DNA hệ gen của các giống ngô nghiên cứu.
- Thiết lập mối quan hệ di truyền của 14 giống ngô.
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
You must be registered for see links