Link tải luận văn miễn phí cho ae Kết Nối
TÓM TẮT: Cây Râu mèo (Orthosiphon aristatus Blume) là một cây thuốc ñược sử dụng rộng rãi
trong y học dân gian Việt nam và nhiều nước trên thế giới như là một thuốc lợi tiểu. Trong các nghiên
cứu trước ñây của chúng tui ñã nhận thấy tác dụng chống oxy hoá mạnh của cao chiết cây Râu mèo
trên các mô hình thử nghiệm in vitro như ferric reducing/antioxidant power và 1,1-diphenyl-2-picryl
hydrazyl. Trong nghiên cứu này, tác dụng bảo vệ tế bào gan ex vivo của cao chiết Râu mèo chống lại
tác dụng gây ñộc trên tế bào gan của carbon tetrachlorid (CCl4) trong mô hình gây tổn thương tế bào
gan chuột tách rời ñược thực hiện nhằm ñánh giá mối tương quan giữa ñặc tính chống oxy hoá và tác
dụng bảo vệ gan của Râu mèo. Mô hình ñược sử dụng là mô hình tách tế bào của Kiso có thay ñổi một
số bước cho phù hợp với ñiều kiện hiện tại của phòng thí nghiệm. Tế bào ñơn sau khi tách ñược ủ phục
hồi với thời gian 2 giờ trong môi trường E’MEM có bổ sung một số chất cần thiết cho tế bào, sau ñó
gây ñộc tế bào bằng CCl4 1,5% trong thời gian 45 phút làm tăng cao hoạt ñộ của enzym ALT trong môi
trường. Kết quả thử nghiệm cho thấy cao chiết methanol cây Râu mèo ở các nồng ñộ khác nhau ñều có
tác dụng hạ enzym gan, bảo vệ tế bào nhưng với các mức ñộ khác nhau. Ở nồng ñộ 0,1 và 0,25 mg/ml
của cao chiết methanol có khả năng làm giảm 60 % nồng ñộ ALT so với nhóm chứng ñộc, ñưa nồng ñộ
ALT về còn 104 % so với nhóm chứng trắng. Từ các kết quả thu ñược, có thể kết luận là cao chiết
methanol của cây Râu mèo có tác dụng tốt trong việc bảo vệ tế bào gan chống lại tác dụng ñộc của
carbon tetrachlorid, có nhiều triển vọng trong việc sử dụng phòng ngừa các bệnh về viêm gan cấp tính.
Keywords: Hepatocytes, Orthosiphon aristatus, CCl4, hepatoprotective effect
1. ĐẶT VẤN ĐỀ
Gan là một cơ quan quan trọng về mặt
chuyển hóa các chất của cơ thể. Một trong
những chức năng rất quan trọng của gan là
tham gia vào quá trình giải ñộc các chất nội
sinh và ngoại sinh. Trong các trường hợp bệnh
lý hay sự quá tải các chất ñộc trong gan, các tế
bào gan sẽ bị huỷ hoại dẫn tới các tổn thương
trên gan dần dần dẫn tới các tổn thương không
hồi phục, xơ gan làm mất chức năng giải ñộc
của gan [5]. Bệnh gan là một trong những vấn
ñề thường gặp trong cộng ñồng. Có nhiều loại
bệnh gan trong ñó thường gặp là những tổn
thương gan gây ra bệnh viêm gan dẫn ñến xơ
gan và ung thư gan cuối cùng là gây tử
vong với nguyên nhân chủ yếu là do virút và
nhiễm ñộc. Phần lớn các chất gây ñộc cho gan
có liên quan tới sự peroxid hóa lipid và các
stress oxy hóa [1].
Hiện nay, các thử nghiệm chống oxy hoá
in vitro và các thử nghiệm trên tế bào gan ex
vivo thường ñược dùng ñể ñánh giá tác dụng
bảo vệ gan của các dược liệu, các cao chiết và
phân ñoạn của dược liệu. Các thử nghiệm này
có ưu ñiểm là nhanh, kết quả lặp lại, có thể áp
dụng ñể sàng lọc một số lượng mẫu lớn trong
thời gian ngắn với chi phí thấp, sử dụng một
lượng mẫu nhỏ. Các thử nghiệm ex vivo có ưu
ñiểm là gần với hệ thống sinh học hơn nên
thường ñược dùng như những thử nghiệm sàng
lọc trước các thử nghiệm in vivo. Trong thử
nghiệm trên các tế bào gan tách rời, phương
pháp của Kiso ñược sử dụng vì có ưu ñiểm là
nhanh và môi trường, hóa chất ñơn giản.
Cây Râu mèo (Orthosiphon aristatus
Blume, họ Hoa môi - Lamiaceae) là một cây
thuốc ñược sử dụng rộng rãi trong y học dân
gian Việt Nam và nhiều nước trên thế giới như
là một thuốc lợi tiểu, ñiều trị viêm thận, sỏi
thận, sỏi mật, tê thấp, ñau nhức, bệnh Goutte
[2, 8] và ñiều trị bệnh tiểu ñường [6]. Trong
các nghiên cứu trước ñây, chúng tui ñã nhận
thấy tác dụng chống oxy hoá mạnh của cao
chiết methanol của cây này trên các mô hình
thử nghiệm in vitro như ferric
reducing/antioxidant power và 1,1-diphenyl-2-
picryl-hydrazyl [7].
Để ñánh giá mối liên hệ giữa tác ñộng
chống oxy hoá của cao chiết Râu mèo với tác
dụng bảo vệ gan, trong nghiên cứu này chúng
tui sử dụng mô hình tế bào gan tách rời gây
nhiễm ñộc bởi carbon tetrachlorid (CCl4) với
một số những thay ñổi cho phù hợp với ñiều
kiện hiện tại của phòng thí nghiệm ñể ñánh giá
tác dụng bảo vệ gan của cao chiết methanol của
cây Râu mèo.
2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
2.1. Hóa chất
Collagenase (Type I) (Gibco), dimethyl
sulfoxide (DMSO) và trypan blue (Merck),
Phosphate Buffered Saline (PBS) (Oxoid),
albumin huyết thanh bò, môi trường Eagle's
minimal essential medium (E’MEM), huyết
thanh bào thai bò, dexamethasone, insulin
(Sigma), kit thử alanine aminotransferase
(ALT) (Diagnosticum Zrt). Các hóa chất khác
ñạt tiêu chuẩn phân tích.
2.2. Vật liệu
Phần trên mặt ñất của cây Râu mèo ñược
thu mua tại Thủ Đức, Thành phố Hồ Chí Minh
vào tháng 4 năm 2007. Mẫu ñược xác ñịnh
bằng việc khảo sát ñặc ñiểm hình thái thực vật
học dựa trên quan sát cây tươi. Dược liệu ñược
rửa sạch, phơi trong bóng râm ñến khô, xay
nhỏ làm nguyên liệu cho quá trình chiết thu
cao.
Chuột nhắt (chủng Swiss albino) ñược
mua từ Viện Vaccin và Sinh phẩm Nha Trang,
ñược nuôi và thử tại phòng thí nghiệm Dược lý,
Khoa Dược – ĐH Y Dược TP. HCM.
2.3. Phương pháp nghiên cứu
Chuẩn bị mẫu thử: 50 g dược liệu ñược
ngâm trong dichloromethan trong 24 tiếng, sau
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
TÓM TẮT: Cây Râu mèo (Orthosiphon aristatus Blume) là một cây thuốc ñược sử dụng rộng rãi
trong y học dân gian Việt nam và nhiều nước trên thế giới như là một thuốc lợi tiểu. Trong các nghiên
cứu trước ñây của chúng tui ñã nhận thấy tác dụng chống oxy hoá mạnh của cao chiết cây Râu mèo
trên các mô hình thử nghiệm in vitro như ferric reducing/antioxidant power và 1,1-diphenyl-2-picryl
hydrazyl. Trong nghiên cứu này, tác dụng bảo vệ tế bào gan ex vivo của cao chiết Râu mèo chống lại
tác dụng gây ñộc trên tế bào gan của carbon tetrachlorid (CCl4) trong mô hình gây tổn thương tế bào
gan chuột tách rời ñược thực hiện nhằm ñánh giá mối tương quan giữa ñặc tính chống oxy hoá và tác
dụng bảo vệ gan của Râu mèo. Mô hình ñược sử dụng là mô hình tách tế bào của Kiso có thay ñổi một
số bước cho phù hợp với ñiều kiện hiện tại của phòng thí nghiệm. Tế bào ñơn sau khi tách ñược ủ phục
hồi với thời gian 2 giờ trong môi trường E’MEM có bổ sung một số chất cần thiết cho tế bào, sau ñó
gây ñộc tế bào bằng CCl4 1,5% trong thời gian 45 phút làm tăng cao hoạt ñộ của enzym ALT trong môi
trường. Kết quả thử nghiệm cho thấy cao chiết methanol cây Râu mèo ở các nồng ñộ khác nhau ñều có
tác dụng hạ enzym gan, bảo vệ tế bào nhưng với các mức ñộ khác nhau. Ở nồng ñộ 0,1 và 0,25 mg/ml
của cao chiết methanol có khả năng làm giảm 60 % nồng ñộ ALT so với nhóm chứng ñộc, ñưa nồng ñộ
ALT về còn 104 % so với nhóm chứng trắng. Từ các kết quả thu ñược, có thể kết luận là cao chiết
methanol của cây Râu mèo có tác dụng tốt trong việc bảo vệ tế bào gan chống lại tác dụng ñộc của
carbon tetrachlorid, có nhiều triển vọng trong việc sử dụng phòng ngừa các bệnh về viêm gan cấp tính.
Keywords: Hepatocytes, Orthosiphon aristatus, CCl4, hepatoprotective effect
1. ĐẶT VẤN ĐỀ
Gan là một cơ quan quan trọng về mặt
chuyển hóa các chất của cơ thể. Một trong
những chức năng rất quan trọng của gan là
tham gia vào quá trình giải ñộc các chất nội
sinh và ngoại sinh. Trong các trường hợp bệnh
lý hay sự quá tải các chất ñộc trong gan, các tế
bào gan sẽ bị huỷ hoại dẫn tới các tổn thương
trên gan dần dần dẫn tới các tổn thương không
hồi phục, xơ gan làm mất chức năng giải ñộc
của gan [5]. Bệnh gan là một trong những vấn
ñề thường gặp trong cộng ñồng. Có nhiều loại
bệnh gan trong ñó thường gặp là những tổn
thương gan gây ra bệnh viêm gan dẫn ñến xơ
gan và ung thư gan cuối cùng là gây tử
vong với nguyên nhân chủ yếu là do virút và
nhiễm ñộc. Phần lớn các chất gây ñộc cho gan
có liên quan tới sự peroxid hóa lipid và các
stress oxy hóa [1].
Hiện nay, các thử nghiệm chống oxy hoá
in vitro và các thử nghiệm trên tế bào gan ex
vivo thường ñược dùng ñể ñánh giá tác dụng
bảo vệ gan của các dược liệu, các cao chiết và
phân ñoạn của dược liệu. Các thử nghiệm này
có ưu ñiểm là nhanh, kết quả lặp lại, có thể áp
dụng ñể sàng lọc một số lượng mẫu lớn trong
thời gian ngắn với chi phí thấp, sử dụng một
lượng mẫu nhỏ. Các thử nghiệm ex vivo có ưu
ñiểm là gần với hệ thống sinh học hơn nên
thường ñược dùng như những thử nghiệm sàng
lọc trước các thử nghiệm in vivo. Trong thử
nghiệm trên các tế bào gan tách rời, phương
pháp của Kiso ñược sử dụng vì có ưu ñiểm là
nhanh và môi trường, hóa chất ñơn giản.
Cây Râu mèo (Orthosiphon aristatus
Blume, họ Hoa môi - Lamiaceae) là một cây
thuốc ñược sử dụng rộng rãi trong y học dân
gian Việt Nam và nhiều nước trên thế giới như
là một thuốc lợi tiểu, ñiều trị viêm thận, sỏi
thận, sỏi mật, tê thấp, ñau nhức, bệnh Goutte
[2, 8] và ñiều trị bệnh tiểu ñường [6]. Trong
các nghiên cứu trước ñây, chúng tui ñã nhận
thấy tác dụng chống oxy hoá mạnh của cao
chiết methanol của cây này trên các mô hình
thử nghiệm in vitro như ferric
reducing/antioxidant power và 1,1-diphenyl-2-
picryl-hydrazyl [7].
Để ñánh giá mối liên hệ giữa tác ñộng
chống oxy hoá của cao chiết Râu mèo với tác
dụng bảo vệ gan, trong nghiên cứu này chúng
tui sử dụng mô hình tế bào gan tách rời gây
nhiễm ñộc bởi carbon tetrachlorid (CCl4) với
một số những thay ñổi cho phù hợp với ñiều
kiện hiện tại của phòng thí nghiệm ñể ñánh giá
tác dụng bảo vệ gan của cao chiết methanol của
cây Râu mèo.
2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
2.1. Hóa chất
Collagenase (Type I) (Gibco), dimethyl
sulfoxide (DMSO) và trypan blue (Merck),
Phosphate Buffered Saline (PBS) (Oxoid),
albumin huyết thanh bò, môi trường Eagle's
minimal essential medium (E’MEM), huyết
thanh bào thai bò, dexamethasone, insulin
(Sigma), kit thử alanine aminotransferase
(ALT) (Diagnosticum Zrt). Các hóa chất khác
ñạt tiêu chuẩn phân tích.
2.2. Vật liệu
Phần trên mặt ñất của cây Râu mèo ñược
thu mua tại Thủ Đức, Thành phố Hồ Chí Minh
vào tháng 4 năm 2007. Mẫu ñược xác ñịnh
bằng việc khảo sát ñặc ñiểm hình thái thực vật
học dựa trên quan sát cây tươi. Dược liệu ñược
rửa sạch, phơi trong bóng râm ñến khô, xay
nhỏ làm nguyên liệu cho quá trình chiết thu
cao.
Chuột nhắt (chủng Swiss albino) ñược
mua từ Viện Vaccin và Sinh phẩm Nha Trang,
ñược nuôi và thử tại phòng thí nghiệm Dược lý,
Khoa Dược – ĐH Y Dược TP. HCM.
2.3. Phương pháp nghiên cứu
Chuẩn bị mẫu thử: 50 g dược liệu ñược
ngâm trong dichloromethan trong 24 tiếng, sau
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
You must be registered for see links